亚细胞**-武汉思特进
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、**、细胞等生物实验。目的构建通用型植物GFP标签蛋白表达载体,研究蛋白质的细胞内**对蛋白质组学和代谢组学等研究的意义。方法构建2种GFP标签蛋白质表达载体,分别在GFP的N和C端预留位点,以目的**。利用该**载体,分别内切酶FokI的切割结构域与MS2噬菌体外壳蛋白MCP的串联蛋白(FokI:MCP:FokI,FMF)至GFP的N和C端,得到FMF与GFP的融合蛋白GFP:FMF和FMF:GFP,其中FMF的N端带有细胞核**信号。利用农介导植物瞬时表达侵染本氏和洋葱表皮细胞,观察GFP荧光表达情况。结果成功构建了2种融合了目的**和GFP的表达载体pER35GFP-FMF和pER35FMF-GFP。激光共聚焦结果显示侵染了只含GFP载体的农的细胞,可在细胞核和细胞质中检测到GFP的绿色荧光,而侵染了含核**信号FMF:GFP和GFP:FMF2种融合蛋白载体的农的细胞,只在细胞核中观察到绿色荧光。结论该载体系统可运用于研究蛋白质在植物细胞中的亚细胞**,具有简单、和通用性的特点。武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、**、细胞等生物实验。采用根*农介导的方法,亚细胞**,以受控于CaMV35S启动子的携带有GFP报告**的双元植物表达载体pCAMBIA1300-35S-GFP转化洋葱表皮细胞.荧光显微镜下观察结果显示,GFP**在经浸染和共培养后的洋葱表皮细胞中得到了表达,绿色荧光分布在细胞核和细胞质中,为进一步研究新**的亚细胞**和瞬时表达奠定了基础.武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、**、细胞等生物实验。***转运蛋白P-typeATPase(HMA)已被证实参与植物体内的***运输,HMA5主要参与铜的转运。在模式植物拟南芥、水稻和黄瓜中对HMA5**进行了较多的研究,但是对豆科植物HMA5的研究鲜见报道。实验室前期在天蓝苜蓿中分离到一个与铜胁迫及共生结瘤相关的HMA5**,为了对此类**在豆科植物共生结瘤中的作用进行深入研究,本研究对全**组已测序的模式豆科植物蒺藜苜蓿的**组进行筛查,寻找HMA5同源**并通过表达模式分析初步判断其与共生结瘤的关系,在此基础上,以其中的MTR_8g079250**为对象,进行亚细胞**、**表达、RNA干扰和过量表达等研究,初步鉴定该**在共生结瘤中的功能。1、MTR_8g079250的亚细胞**构建MTR_8g079250的洋葱表皮亚细胞**载体,通过**枪轰击转化洋葱表皮细胞,在激光共聚焦显微镜下观察到MTR_8g079250::GFP融合蛋白主要在细胞膜上表达,在细胞核上也有微量的表达;构建MTR_8g079250的叶片亚细胞**载体,通过根*农介导**叶片的方式进行转化,结果表明目的**主要**在细胞膜和细胞核上;2、MTR_8g079250的**表达构建PMTR_8g079250::GUS融合表达载体,通过农发根转化的方式转入蒺藜苜蓿根部,经培养后,进行GUS染色观察。亚细胞**-武汉思特进由武汉思特进科技发展有限公司提供。武汉思特进科技发展有限公司在办公、文教项目合作这一领域倾注了诸多的热忱和热情,思特进一直以客户为中心、为客户创造价值的理念、以品质、服务来赢得市场,衷心希望能与社会各界合作,共创成功,共创辉煌。相关业务欢迎垂询,联系人:夏经理。)